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  • 您的位置:写论文网 > 哲学论文 > 哲学其它论文 > RP-HPLC法测定血管康袋泡茶中... 正文 2019-08-20 07:41:44

    RP-HPLC法测定血管康袋泡茶中芦丁的含量:芦丁含量的测定

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    【摘要】 目的 建立测定血管康袋泡茶中芦丁含量的方法。方法 采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC),十八烷基键合硅胶柱分离芦丁,以甲醇-水-冰醋酸(40∶60∶1)为流动相,流速为1.0 mL/min,检测波长257 nm。结果 芦丁线性范围为0.06~0.3 μg,r=0.999 2,平均回收率为98.48%,RSD=0.87%(n=5)。结论 该法便捷、灵敏、准确、重现性好,可用于该产品的质量控制。

    【关键词】 血管康袋泡茶;芦丁;反相高效液相色谱法

      Abstract:Objective To establish a method for determination of rutin in Xueguankang Tea. Methods RP-HPLC method and C18 column were used for determination. Methanol-water-acetic acid (40∶60∶1) was the mobile phase with a flow rate of 1.0 mL/min. The detection wavelength was set at 257 nm. Results There was a good linear relationship of rutin within the range of 0.06~0.3 μg with r=0.999 2. The average recovery of rutin was 98.48 % with RSD=0.87% (n=5). Conclusion This method is convenient, sensitive, accurate and reproducible, and can be used for the quality control of Xueguankang Tea.

      Key words:Xueguankang Tea;rutin;RP-HPLC

    血管康袋泡茶系由槐米等中药研制而成,具有凉血止血、疏肝平血之功效,能降低血管脆性,恢复血管弹性,清除自由基。临床主要用于治疗动脉硬化、脑溢血、心脑血管等疾病,并作为高血压病的辅助治疗药物。槐米为方中君药,芦丁为槐米的主要有效成分[1]。为有效控制该产品的内在质量,本实验采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)对该制剂中芦丁的含量进行了测定,结果表明,该法操作便捷、灵敏、准确、重现性好。

      1 仪器与试药

      美国Waters 1525高效液相色谱仪,Waters 2487紫外检测器,Bree色谱工作站,天津HS6150型超声波清洗器,METTLER AE240电子天平。芦丁对照品购自中国药品生物制品检定所(批号100080- 200305);血管康袋泡茶由本院自制(批号20041228、20050109、20050807)。甲醇为色谱纯,冰醋酸为分析纯,水为纯净水。

      2 方法与结果

      2.1 色谱条件

    色谱柱:Symmetry C18(5 μm,4.6 mm×250 mm);流动相:甲醇-水-冰醋酸(40∶60∶1);流速:1.0 mL/min;柱温:室温;检测波长:257 nm。

      2.2 对照品溶液的制备

    精密称取芦丁对照品适量,加甲醇制成每1 mL含0.149 8 mg的溶液,作为对照品溶液。

      2.3 供试品溶液的制备

    取本品内容物,研细,过40目筛,取约0.1 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇25 mL,称定重量,超声处理30 min,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,滤过。精密量取续滤液1 mL,置10 mL量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,用微孔滤膜(0.45 mm)滤过,取续滤液,即得。

      2.4 线性关系的考察

    精密吸取芦丁对照品溶液(含芦丁0.149 8 mg/mL)1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL分别置于25 mL量瓶中,用甲醇定容至刻度,摇匀,按上述色谱条件,进样10 μL,测定,记录色谱图。以峰面积对进样量进行线性回归,得回归方程:Y=26 139 583X-78 169.5,r=0.999 2。结果表明,芦丁在0.06~0.3 μg范围内峰面积与进样量有良好的线性关系。

    2.5 精密度试验

    精密吸取上述稀释的同一对照品溶液20 μL,重复进样5次,计算峰面积,RSD=0.85%。

      2.6 稳定性试验

    精密吸取新鲜配制的供试品溶液,每隔2 h测定1次,连续测定6次,计算芦丁峰面积,RSD=1.15%。表明供试品在12 h内稳定性较好。

      2.7 重复性试验

    精密称取同一批号(20041228)的样品0.1 g,共6份,按供试品溶液的制备方法制备6份供试品溶液,分别进样20 μL,进行测定,计算峰面积,RSD=1.34%。表明本法重复性较好。

      2.8 样品测定

    精密称取不同批号制剂的内容物0.1 g,各3份,制备相应的供试品溶液。分别吸取对照品溶液和供试品溶液各20 μL,分别注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定,以外标法计算样品中芦丁的含量。各批号制剂中芦丁的平均含量测定结果见表1。表1 血管康袋泡茶中芦丁的含量测定结果(略)

      2.9 加样回收率试验

    取同一批已知含量的血管康袋泡茶(批号20041228,含量0.233 8 g/g),精密称取5份,加入芦丁对照品适量,混匀,按供试品溶液的制备方法制备,并按上述色谱条件测定,计算回收率,结果见表2。表2 加样回收率试验结果(略)

      3 讨论

    在流动项的选择过程中,我们曾采用文献[2]报道的乙腈-四氢呋喃-0.2 %枸櫞酸溶液(14∶1∶85),并以30∶70、40∶60、50∶50体积比的甲醇-水和添加了一定量冰醋酸的多种流动相进行了比较,结果表明,以甲醇-水-冰醋酸(40∶60∶1)为流动相,能使芦丁与样品中其它组分得到较好的分离,且成本更低。

      血管康袋泡茶中槐米为君药,芦丁又是槐米的主要有效成分,所以,对芦丁的含量进行定量测定,可以作为本制剂的质量控制指标。试验结果表明,采用RP-HPLC法便捷、灵敏、准确、重现性好,适合于血管康袋泡茶的质量控制。

    【参考文献】

      [1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京:化学工业出版社,2005.246.

      [2] 程秀民,尘学兰,高彦慧,等.RP-HPLC测定槐米中芦丁和槲皮素含量[J].中成药,2004,26(8):680-682.

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