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李 生 朱 冉 周桂芝 曹建梅
黑龙江省鸡西市矿业集团总医院，黑龙江鸡西158100
摘要：病理诊断是现代医学中最具权威性的诊断方法，病理诊断的准确性，一方面取决
关键词：HE染色；临床病理；诊断应用
中图分类号：R446.8文献标识码：A文章编号：1671-5837(2015)25-0106-01
在病理技术中，原位杂交技术和免疫组织化学技术存在着一定的局限性，但是在另一方面，染色技术仍然能够发挥重要的作用，其临床价值较高。HE 染色是苏木精－伊红染色法的简称，属于石蜡切片技术中比较常用的一种，在病理学教学及科研中得到广泛的应用。通过大量的病理学科研成果可知，病理学诊断的准确性不仅与病理医生的技术水平有关，同时还取决于组织病理切片的质量及染色效果。但是在实际情况中，制片的质量往往受到多种因素的影响，而染色效果也因此各有差异。为提高病理诊断的准确性，有必要对病理制片和HE染色技术加以改进。
1 资料与方法
1.1 一般材料
选择某院2013年1-12 月各个科室送检的968 例石蜡病理切片作为研究对象，其中活检组织349 例、子宫内膜300 例、脂肪组织187 例，骨组织98 例、快速冰冻80 例观察，510 例进行细胞学制片结果进行对照、观察。所有的病理切片在环境温度适宜以及试剂浓度相对标准的情况下进行HE 染色，均可以获得较为满意的效果。
1.2 方法
采用HE 染色，即为苏木精-伊红染色法，是石蜡切片技术中最为常用的染色方法。其中苏木精是一种自然的染料，但是本身没有染色的能力，鼻血经过化学氧化后变成苏木红，可以作为染料。苏木精对细胞核亲和力较弱，在助染剂的协同下达到染色的效果，在碱性环境中，苏木红显色呈蓝色；伊红属于酸性染料范围，主要可以使细胞质及细胞外基质中的成为着色显示为红色。一般的病理切片组织变化及组织的产物均可以通过HE 染色法显示，在质量好的HE染色板中，组织或者细胞的一般形态均可以通过显微镜观察出。
2 应用
（1）染色方法。病理科室在选择材料进行病理切片制作中，应该该局不同组织采用不同的固定、脱水时间、不同的制片染色方式。手术室中切除的全部或者部分器官或者采用大块的组织切除标本，各种各样细胞学的标本，特出检查的体液或者血液标本，病理科室医生取材过程中要做到准确、迅速、完整以及具有代表性。HE 染色操作的流程主要包括：细胞涂片均潮干后固定在浓度为95% 的乙醇中浸泡15 min，显微镜观察后，在之前固定的切片中选定进行免疫染色的区域，在区域的背面载玻片中用签字笔进行标记，标记号需要进行染色的抗体。后将细胞涂片按照顺序经过二甲苯、梯度的乙醇溶液和水，将涂片上的盖玻片及树胶洗脱完全；后加入0.5% 盐酸-乙醇中将苏木红的颜色进行清洗，后采用水进行冲洗，加入稀释后的氨水将伊红的颜色脱掉；将载玻片单独拿出后浸泡于水中，多次进行洗涤，采用树胶或者DPX 以盖片封片，帖标签；根据镜下观察到的细胞形式进行适当的调整，染色各个步骤所需要的时间，会受到温度、切片厚度等的影响；各种染料试剂一般均以化学纯为主。染色过程中，勿使切片干燥，以免影响细胞形态。染色完毕后用显微镜检查染色结果，是否符合要求，并核对标本种类、号码、数量是否无误，以保证制片的质量，为临床病理诊断垫定坚实基础。
（2）结果。病理科室通过将大小标本进行分开固定、脱水、染色等，苏木精将细胞核染成鲜明的蓝色，骨组织呈现深蓝色，骨组织中的黏液质呈灰蓝色。呈现的结果表明，各种组织切片在显微镜下观察，HE 染色结果基本达到病理所规定的标准，结果见表1。
表1
（3）病理科室对于组织细胞的取材、脱水、切片的质量对于HE 染色的结果具有较大的影响，组织切片染色的质量直接影响着病理切片的诊断结果，对于诊断不明确的结果也会延伸到临床中对疾病的治疗，因此，不同的标本要有不同的取材方式，包括了取材标本的范围，对于标本的取材方法。HE 染色过程中关系染色成败的最关键的因素取决于对细胞核的着色，由物理及化学共同的作用进行这项工作，一方面主要是因为组织内部有许多微小的细孔，染料渗透后与组织进行牢固的结合，组织吸收染料后逐渐扩散、溶解，进而牢牢的固定；另一方面在于组织细胞内部含有酸性及碱性的物质，含有的酸性物质可以与染液中的部分阳离子进行结合，生成固定的分子，含有碱性物质的与染液中的阴离子结合，共同起到牢固性的作用。固定的主要目的在于使组织及细胞保持与活体时相似的成分以及形态，防止制片过程中组织的自溶，组织原有的构造消失或者被破坏而影响了诊断的结果。固定后应该及时的送检，防止组织固定时间过长后导致变脆、变硬而影响了切片的效果，影响诊断结果，导致错误的治疗。HE 染色过程中应该注意采用的试剂的浓度变化，控制适当的温度及湿度，保证切片的质量，提高诊断结果的准确率。
综上所述，通过不断提高的HE染色技术，采用不同的固定、脱水、切片，提高了切片的质量，显著性的提高了病理诊断的准确率，由于结果的准确，也大大提高了临床上对针对性疾病的治愈率，为临床上提供了准确率更高的病理资料。因此，HE 染色技术是病理诊断、临床治疗过程中不可或缺的重要检测手段，通过诊断结果的准确性，为临床的治疗提供参考依据，具有明显的临床价值。
参考文献
[1]马中．诊断细胞病理学[M]．郑州：河南科学技术出版杜，2010：76－99
[2]王伯云，李玉松，张远强．病理学技术EM]．北京：人民卫生出版社，2013：6－54．
[3]鲁香凤．病理标本取材和填写病理申请单应注意的问题[J]．中国实验诊断学，2011，3(3)：137－138．
[4]王玉芳，徐晓艳，等．常用特殊染色在病理诊断中的应用［J］．实用医技杂志，2013，18(12) :1357－1358．
