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议NAP在血液病中鉴别诊断的应用
议NAP在血液病中鉴别诊断的应用 【摘要】目的研究中性粒细胞碱性磷酸酶（NAP）活性测定在血液病鉴别 诊断中的应用价值。方法采集215例血液病患者和30名健康人的静脉血制备血涂 片，经Kaplow偶氮偶联法进行NAP细胞化学染色，显微镜油镜观察100个成熟中 性粒细胞，以五级积分值记录结果。结果急性淋巴细胞白血病(ALL)、类白血病 反应(LR)、再生障碍性贫血(AA)、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、多发性骨髓瘤 (MM)，真性红细胞增多症(PV)6组疾病NAP积分明显高于对照组(P0.01)；CLL、 恶性组织细胞病(MH)、骨髓增生异常综合征(MDS-RAEBT)、阵发性睡眠性血红 蛋白尿症(PNH)4组疾病NAP积分明显低于上述6组疾病和对照组(P0.01)；
AMLNAP积分略低于对照组，但差异无显著性(P0.05)，与ALL比较差异有高度 显著性(P0.01)。结论NAP活性测定可支持血液病的鉴别诊断。
【关键词】碱性磷酸酶；
血液病 碱性磷酸酶主要见于成熟中性粒细胞、网状细胞和吞噬细胞，其他细胞皆 为阴性反应。总结我院血液科215例血液病人的中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)活 性观察，进行对比分析，以探讨NAP在血液病中鉴别诊断的应用价值。
1资料与方法 1.1一般资料本组215例血液病均来源于我院血液科2002～2007年经骨髓 涂片细胞学分析、病理检查及有关实验室检查并结合临床参照文献［1］确诊病 例，其中再生障碍性贫血(AA)47例、骨髓增生异常综合征(MDS-RAEBT)5例、真 性红细胞增多症（PV）4例、急性髓细胞白血病(AML)69例、急性淋巴细胞白血 病(ALL)50例、恶性组织细胞病(MH)3例、类白血病反应（LR）13例、阵发性睡 眠性血红蛋白尿症(PNH)4例、慢性粒细胞白血病(CML)13例、多发性骨髓瘤 （MM）4例、慢性淋巴细胞性白血病（CLL）3例。健康人群30例为对照组，其 中男18例，女12例。患者和健康人群均采集静脉血制备血涂片2张。
1.2试剂Kaplow偶氮偶联法：①固定液：25%甲醛乙醇溶液；
②丙二醇缓 冲液：0.05mmol/L2-氨基-2-甲基-1，3-丙二醇溶液(pH9.75)；
③基质孵育液 (pH9.4-9.6新鲜配制)：α-磷酸萘酚钠20mg溶于缓冲液20ml，再加入坚牢蓝 RR20mg；
④苏木素复染液。细胞染色方法:新鲜血片用固定液冷固定(4～10℃)30s， 水洗、晾干后放入基质孵育液(按上述方法新鲜配制)中，37℃温浴30min，流水 冲洗，晾干后苏木素复染液复染5min，水洗、晾干。显微镜油镜观察100个成熟中性粒细胞，按每个细胞浆内颗粒多少分成五级：(-)、(1+)、(2+)、(3+)、(4+)， 用半定量记分法，以积分值记录结果［2］。
1.3统计学处理计量数据以±s表示，应用SPSS10.0统计软件，行单因素方 差分析，以α=0.05为检验标准。
2结果 2.1对照组与血液病患者NAP积分结果对比AA、LR和ALL等的NAP积分显 著高于对照组；
MDS-RAEBT、CML、MH、PNH的NAP积分明显低于对照组， 其中MH和CML的NAP积分最低；
AML的NAP积分略低于对照组，但差异无显著 性，见表1。
2.2LSD及S-N-K多重比较结果AA与PNH的NAP积分差异有高度显著性 （t=4.95，P＜0.01)；
NAP积分在LR与CML组间(t=16.62)、ALL与AML组间 (t=15.08)、MH与MM组间(t=4.11)、CLL与CML组间(t=59.34)差异均有高度显著 性（P＜0.01)，这与杨晓春等人的研究结果一致［3］。
3讨论 NAP是成熟粒细胞S颗粒释放的一种酶，其活力与成熟粒细胞的成熟程度 和功能、感染的程度、细菌或病毒的种类有关［2］。在严重细菌感染，LR、AA、 ALL、CML急性变，PV、MM等疾病中NAP活性增高；
在CML、MH、MDS-RAEBT、 DNH、继发性红细胞增多症等疾病中NAP活性减低。
表1215例血液病与对照组NAP积分比较（略） 注：t为与对照组比较 本组资料显示，在215例血液病中各组疾病NAP的活性积分与对照组比 较：ALL、LR、AA、MM均明显高于对照组；
MDS-RAEBT、CML、MH、PNH 均明显低于对照组。而在各组疾病的鉴别诊断，如PNH与AA的鉴别：前者降低， 后者显著增高，AA者中性粒细胞越低，贫血越重，NAP则越高。经过观察，AA 在缓解时NAP积分有下降趋势，但很难恢复正常。ALL与AML的鉴别中，前者 NAP活性增多明显，后者NAP活性正常或略低。CML与LR的鉴别中，前者明显 降低，后者明显增高［4］。MH与反应性组织细胞增生症差异有显著性，前者降 低，后者增高。综上所述，NAP的活性对于血液病的鉴别诊断有重要临床价值。
