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【关键词】 罗布
［摘要］ 目的 了解罗布麻纤维的抗菌性能。方法 采用烧瓶振荡法，在恒温振荡器转速200 r/min、温度37 ℃条件下，将细菌与罗布麻纤维在pH 6.0的PBS中作用2 h，通过平板计数法计算抑菌率，对罗布麻纤维的抗菌力做出评价。结果 罗布麻纤维对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌和白色念珠菌的抑菌率分别为47.7%、69.0%、56.6%和40.1%。结论 罗布麻纤维具有较强的抗菌性。
［关键词］ 罗布麻纤维；抗菌性；烧瓶振荡法；抑菌率
［ABSTRACT］ObjectiveTo study the antibiotic property of Apocynum venetum. MethodsShakeflask method was used at 37 ℃ and 200 r/min rotational speed of constant temperature oscillator. The bacteria and Apocynum venetum acted for 2 h in pH 6.0 PBS liquid. The bacteriostasis rate was calculated and the antibiotic property of Apocynum venetum was examined through colony counting method. ResultsBacteriostasis rate was 47.7%, 69.0%, 56.6% and 40.1% to staphylococcus aureus, bacillus pyocyaneus, coliform and Candida albicans, respectively. ConclusionThe Apocynum venetum has good antibiotic characteristics.
［KEY WORDS］Apocynum venetum; antibiotic property; shakeflask method; bacteriostasis rate
罗布麻是一种野生植物纤维。它不仅具有良好的服用性能，还具有医疗保健作用，是不可多得的天然医疗保健纤维。本文采用烧瓶振荡法［1,2］，从微生物学角度对罗布麻纤维的抗菌性能做出评价。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 抗菌材料及菌种 罗布麻纤维，由青岛大学纺织学院提供；菌种包括金黄色葡萄球菌(NCTC 26025)、铜绿假单胞菌(ATCC27853)、大肠埃希菌(ATCC25922)和白色念珠菌(ATCC10231)，由青岛大学医学院菌种室保藏。
1.1.2 试剂与仪器 PBS缓冲液，pH 6.0，本室配制；生理盐水购自莱阳经济技术开发区精细化工厂；各种培养基购自杭州天和微生物试剂有限公司；J3034电热恒温培养箱，南京市江宁电器仪器厂；SHZ82恒温振荡器购自广州国华电器有限公司。
1.2 方法
1.2.1 罗布麻纤维的处理 将无菌罗布麻纤维及对照样棉纤维0.75 g，分别加入到含有70 mL无菌PBS的烧瓶中，冷藏待用。同时以仅含有70 mL PBS的烧瓶作为空白对照。
1.2.2 菌悬液的制备 复苏后的菌种传代2~3次，培养物接种于新鲜肉汤培养基中，37 ℃恒温培养箱孵育6 h（白色念珠菌需要在沙保罗肉汤培养基中培养20 h左右），通过比浊，将菌悬液用无菌生理盐水稀释至（1.5~2.0）×108CFU/L。
1.2.3 抗菌实验 采用烧瓶振荡法。将各种菌悬液分别吸取5 mL加入烧瓶内，摇匀，从各瓶中取0.5 mL用无菌生理盐水做1∶10，1∶100，1∶1 000稀释后取适量置入培养皿，琼脂冷却至45 ℃倾注，摇匀，待冷却凝固后，37 ℃孵育18 h，进行菌落计数［3,4］。将加入菌悬液的烧瓶固定于37 ℃电热恒温振荡器上，以200 r/min振荡2 h，然后重复上述步骤1次。
1.2.4 抑菌率计算 采用公式：μ=(A-B)/A×100%。其中A为试样振荡前平均菌落数，B为试样振荡后平均菌落数。试验样品抑菌率与对照样品抑菌率之差>26%，即可认定该纺织品具有抗菌作用。
2 结 果
2.1 抑菌率罗布麻纤维试样的培养皿中菌落数较少，而棉纤维试样的培养皿中布满了菌落。罗布麻纤维对几种常见致病菌的抑菌率见表1。
表1 罗布麻纤维对几种常见致病菌的抑菌率（略）
2.2 金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌被罗布麻纤维作用前后形态比较电镜下观察，罗布麻纤维作用前，细菌生长旺盛，没有任何细菌残骸。经过2 h振荡接触后，附着在罗布麻纤维上的细菌形态发生了变形或崩裂分解（图1~4）。
3 讨 论
罗布麻纤维含有多种抗菌成分，本身具有良好的抗菌性，广泛应用于医疗、纺织、保健等各个领域。有关其应用的报道亦有不少。本文结果表明，罗布麻纤维对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌和白色念珠菌的抑菌率分别达到47.7%、69.0%、56.6%和40.1%，提示罗布麻纤维具有较强的抗菌性能。但是罗布麻纤维对革兰阳性菌和阴性菌的抑制能力是不一样的，对革兰阴性菌，尤其是铜绿假单胞菌的作用能力比较强，对革兰阳性菌的作用能力相对弱一些，这可能与细菌的细胞壁结构有关。革兰阳性菌的细胞壁较厚（20~80 nm），含有15~50层肽聚糖，大多数还含有大量的磷壁酸，蛋白质含量较少；革兰阴性菌细胞壁较薄（10~15 nm），含有1~2层肽聚糖，其主要成分是外膜，蛋白质含量多。罗布麻纤维中抗菌物质通过破坏细菌的细胞壁结构，从而抑制细菌生长。本文电镜照片显示，罗布麻纤维对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌作用的程度有差别，附着在纤维上的金黄色葡萄球菌有些形状已经改变，有些已经分解；而附着在纤维上的大肠埃希菌均完全崩裂，没有完整的细菌存在。本文仅就罗布麻纤维的抗菌性能进行了一些直观的分析和研究，有关抗菌机制方面的研究，还需要再做进一步的探讨。
［参考文献］
［1］卫生部.消毒技术规范［S］.北京：中华人民共和国卫生部,1999.
图1、2 金黄色葡萄球菌与大肠杆菌被罗布麻纤维作用前的电镜观察 ×10 000 图3、4 金黄色葡萄球菌与大肠杆菌被罗布麻纤维作用后的电镜观察 ×5 000
［2］王俊起,王有斌.纺织品抗菌功能方法研究［J］.中国卫生工程学,2003,2(3):129.
［3］倪语星.微生物学和微生物学检验实验指导［M］.北京：人民卫生出版社,2001：25.
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